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國家生豬產業技術發布《防控非洲豬瘟恢復生豬生產九項關鍵技術》

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簡介
國家生豬產業技術體系編寫了《防控非洲豬瘟恢復生豬生產九項關鍵技術》,本文介紹以下九項內容:非洲豬瘟早期發現與精準檢測,精準清除,構建完善的豬場生物安全...

國家生豬產業技術體系編寫了《防控非洲豬瘟恢復生豬生產九項關鍵技術》,本文介紹以下九項內容:非洲豬瘟早期發現與精準檢測,精準清除,構建完善的豬場生物安全,規范實施消毒及污染源消除,復產前的風險管理,優化種豬繁育模式、保障種源供給,嚴把飼料關,改造豬舍、優化生產管理,提升屠宰場的生物安全等級,內容精要,干貨滿滿!

非洲豬瘟病毒(ASFV)是一種有囊膜的DNA病毒,是非洲豬瘟病毒科、非洲豬瘟病毒屬的唯一成員。ASFV粒子直徑約為200納米,呈正20面體結構,由多層同心圓結構組成,由內到外依次是基因組DNA、基質層、內膜、核衣殼和外囊膜。ASFV的基因組為線性雙鏈DNA,大小約為170-193kb,含有150-167個開放閱讀框(ORFs),由一個大約125kb的中心保守區和兩個含5種多基因家族(MGFs)的變異末端組成。依據編碼主要衣殼蛋白p72的基因B646L的部分核苷酸序列,ASFV可以被分為24個基因型。


首次發現的傳入我國的ASFV毒株屬于基因II型。ASFV不能誘導中和抗體免疫。ASFV的衣殼蛋白p72,膜蛋白p54、p30和p12具有良好的抗原性。在感染豬或康復豬體內,50余種病毒蛋白可誘導抗體應答,可用做血清學診斷的抗原。自然感染條件下,ASF的潛伏期為3-21天,感染豬在潛伏期即可排毒,臨床癥狀出現后可通過分泌物和排泄物大量排毒。


ASFV耐受酸堿的范圍較廣,pH4-10條件下在無血清的培養基中保持穩定,但在pH值低于4或高于11.5,數分鐘內可被滅活。ASFV對環境的抵抗力很強,在尸體中可存活6個月以上,在低溫條件下可存活數年;在腐敗的血液中可存活15周;在冷鮮肉中存活數周至數月;在腌制和熏制的豬肉產品中可長時間存活;在糞便中可保持感染性數周。


ASFV對熱的抵抗力較弱,60℃30分鐘或56℃70分鐘可被滅活。一般的消毒措施均可有效殺滅ASFV。最有效的消毒劑是去污劑、次氯酸鹽、堿類及戊二醛。


ASF的自然傳播速度慢,高度接觸傳播,直接接觸、采食、蜱蟲叮咬、注射等可傳播疫病。消化道(口)和呼吸道(鼻)是ASFV的主要感染途徑。蒼蠅、蚊、鼠等可機械性傳播ASFV。


ASFV有強毒力、中等毒力和低毒力等三種類型毒株。臨床上可分為最急性型、急性型、亞急性型和慢性型。


最急性型:發病豬體溫達41℃-42℃,呈現厭食、食欲廢絕、精神沉郁、皮膚充血等癥狀,1-4天內死亡。也有無癥狀死亡的豬。發病率和病死率均可達100%。


急性型:發病豬體溫達40℃-42℃,呈現厭食、不愿活動、皮膚發紅、嘔吐、鼻腔出血、血便、便秘等。妊娠母豬流產。病死率可達90%-100%。


亞急性型:與急性型類似。病豬出現中度發熱,食欲下降。皮膚出血和水腫,感染后7-20天死亡,病死率為30%-70%。


慢性型:病豬體重下降、生長不良,呈現間歇熱,耳部、腹部和大腿內側皮膚發生壞死或潰瘍,關節腫大,感染豬可出現呼吸道癥狀。



一、早期發現與精準檢測

早期發現


為盡早發現ASF疫情,首先要讓豬場全體員工熟悉ASF的臨床癥狀。了解周邊三公里范圍內的養豬場戶、屠宰場點、生豬交易場所、無害化處理場等情況,密切關注周邊生豬異常死亡情況,及時發現疫情隱患。


時刻關注本豬場各個環節的豬只異常情況,包括豬只的精神狀態、采食情況、體溫變化、體表變化和經產母豬表現等。一旦發現可疑癥狀,第一時間采樣送檢(采樣優先順序:鼻腔拭子>唾液>陰門拭子>肛門拭子)。


精神狀態:及時發現欄舍內眼神異常豬只(這時豬只可能還未排毒)、精神沉郁的豬只,并及時采樣和送檢。豬場要積極發動一線員工關注異常豬只,對于提前發現豬只異常并及時采樣經實驗室檢測陽性的,給予相應獎勵。


采食情況:關注群體和個豬只的采食情況,對于采食量稍微減少(排除飼料因素),要盡快采樣送檢。采食量明顯下降的豬只一般會伴隨著體溫升高。


體溫變化:正常保育豬、育肥豬體溫一般在39℃-40℃之間;正常成年基礎豬群的體溫在38℃-39℃之間(其中母豬發情、分娩前后幾天,體溫會升到39℃-40℃之間)。如果發現體溫超過正常范圍的豬只,應及時采樣送檢。為了防止測量體溫時交叉污染,體溫計必須一豬一換,須戴手套和穿防護服;可采用遠紅外體溫計測溫,盡量不入欄。


體表變化:看到皮膚發紅豬只,表明豬只處于發燒狀態。另外,有些豬只打針時出現凝血不良。對于這些異常豬只,要及時采樣進行檢測。


經產母豬的表現:經產母豬除上述臨床表現外,還會出現流產。ASF造成流產有別于其他疫病常見的黑胎或白胎,會出現胎兒均質發紅。


精準檢測

快速精準檢測為實現快速準確檢測,ASF樣品采集非常關鍵。當疫情暴發(被動監測)時,應針對患病豬、死亡豬及豬舍環境進行采樣;而在常規監測時,應對ASFV易感豬群及環境(如出豬臺、場區大門等風險較大的地方)進行采樣;如果是針對處于精準清除的群體,采樣的數量可以適當加大。采樣應注意避免交叉污染,并在采集每頭豬只后更換一次性手套。觸碰豬只、料槽、欄桿后,及時更換一次性手套。采血時,必須做到每采集1頭豬只更換1個新的針頭,以免造成ASFV傳播。提交到診斷實驗室的相關樣品應有清晰且保存持久的標簽,樣品質量良好。所有采樣后的防護用品焚燒或高壓處理。


(1)疑似發病豬場采樣

采樣工作準備:準備長的棉簽(15厘米以上)、醫用紗布、自封袋、一次性注射器、防護服、一次性長臂手套、鞋套、大的塑料袋(或塑料布,用于包裹病死豬)、記號筆、記錄紙、筆、甲醛溶液、Eppendorf管、拉鏈式自封袋、垃圾袋、錄像機(手機)、手電筒、拖布、消毒藥、火焰噴槍等。


樣品類型:

①疑似豬只口鼻拭子。將每頭豬口、鼻拭子收集于同一采樣管中,以便提高檢測的準確性和減少工作量。拭子裝于Eppendorf管內,建議將樣品保存于4℃,立刻送檢,沒有實驗條件的應在24小時內送至有資質的實驗室。


②病死動物的腹股溝淋巴結。突然死亡的豬只,由于血液及臟器中攜帶大量的病毒,建議僅采集腹股溝淋巴結,然后將病死豬包裹后進行無害化處理。


③全血。用含有EDTA抗凝血劑的真空采血管,從頸靜脈、前腔靜脈或耳靜脈抽取全血。如果豬只已經死亡,可以立即從心臟采血。不宜使用肝素作為抗凝劑,因其可以抑制PCR反應而造成假陰性。


偏遠地區或者在無法冷鏈運輸的時候,可經干血斑(DBS)進行微量血液樣品的采集和儲存。將幾滴由刺血針或無菌注射器針頭從動物的靜脈或皮膚滴加到特制的吸水濾紙中完成干血斑(DBS)樣品的收集。血液樣品應完全浸透濾紙,并風干數小時。將樣品儲存在低透氣性的塑料袋中,加入干燥劑以減少濕度。


④血清。使用未加抗凝劑的真空采血管從頸靜脈、前腔靜脈、耳緣靜脈,或剖檢過程收集血液樣品。


⑤器官和組織樣品。不推薦進行剖檢采樣,因易造成ASFV的擴散。必須在保障生物安全的條件下進行剖檢,所有的豬器官和組織均可用于檢測ASFV,但脾臟、淋巴結、肝臟、扁桃體、心臟、肺、腎臟及骨髓等含毒量較高。


⑥軟蜱等媒介樣品。鈍緣蜱可以用于檢測ASFV。有三種收集技術:手動收集、二氧化碳誘捕和真空吸引捕捉。收集后,應讓蜱保持存活或直接儲存在液氮中,避免DNA降解。


⑦環境樣品。以區塊為單位,對風險等級進行區域采樣。如豬場內所有墻體、地面、設備等表面進行全覆蓋采樣。


生產區內:包括各區間豬舍內所有區間單元墻體、地面、風機、地溝、設備、水線、料線等。采樣應全覆蓋包括死角、料槽底部等不易采集到的位置。


生產區外:對可能的風險區域進行采樣,包括出豬臺、場區大門、料塔、下水道、員工宿舍、儲物間、浴室、辦公室、餐廳廚房、車輛、水源等所有可能受到污染的區域。


(2)包裝和運輸樣品

采集好的樣品應仔細進行包裝,做好標記并送到實驗室。運送的樣品必須有足夠數量的冷卻材料(如冰袋、干冰),避免變質。樣品應使用“三重包裝系統”,保障運輸過程中的生物安全,并避免樣品受到污染。樣品運輸必須遵守農業農村部《高致病性動物病原微生物菌(毒)種運輸包裝規范》等規定。


(3)廢棄物處理

采樣結束后,做好尸體、場地、物品、個人防護用品的消毒和無害化處理。對不同場點盡量安排不同的采樣人員,避免交叉污染。


(4)快速精準檢測

實時熒光定量PCR(qPCR)是實驗室快速檢測ASFV的常用方法。大型養豬企業可建設ASFV檢測實驗室,當豬場周邊和自己豬場受到威脅時做好疫情排查與監測,為疫情處置和精準清除提供技術支撐。開展qPCR檢測必須配備專用的實時熒光PCR儀和相應檢測試劑。實驗室可以根據技術標準開展ASFV的qPCR檢測。由于qPCR檢測技術靈敏,極其微量的污染即可造成假陽性,對PCR實驗室進行分區管理可以避免檢測污染。應根據條件將PCR實驗室分為試劑準備區、樣本制備區、產物擴增區等。


(5)疫情確診

中國動物衛生與流行病學中心或省級動物疫病預防控制中心實驗室可以按要求確診ASF疫情。


二、精準清除


精準清除是指采集合適樣品,在實驗室檢測結果基礎上,結合流行病學調查和風險分析,準確判定感染個體和群體,科學劃定疫點范圍,迅速清除發病豬與感染豬,消滅傳染源等的各種活動總稱。


疫點清除


整欄清除:對于保育、育肥群體,在ASF傳入早期,病豬數量極少,聚集在同一欄內,可實施整欄清除。


整棟清除:同時滿足下述3個條件的,可實施整棟清除:陽性病例呈多點散發狀態且只局限于某一棟豬舍,其他豬舍或生產線未檢出ASFV感染陽性豬;棟舍之間有可靠的物理隔離屏障(如實體圍墻);嚴格限制場內員工交叉串舍。清除過程中,人員不可與相鄰豬舍接觸。


單元清除:如果在不同飼養單元檢出ASFV核酸陽性,且不同單元有實體墻或其他密閉設施相互分隔,豬群之間不可能通過飲水或排污設施發生交叉感染,人員不交叉,可實施單元清除。

全場清除:如果不同棟舍均有檢測陽性感染豬或確診的病豬,且呈點狀彌散狀態,而且是共用水槽、食槽,即使不同棟舍之間有嚴格的物理隔離設施或其他屏障,建議實施全場清除。


清除策略


病死豬:需要放入密閉袋,用密閉工具運出豬舍,實施無害化處理。


無法運動的病豬:采用電擊方式處死后,裝入密閉袋,實施無害化處理。


正常運動的感染豬:體重過大豬,可驅趕到無害化處理點再用電擊處死,但趕豬通道的地面要鋪上塑料或彩條布等;對體重較小的豬(保育豬和哺乳仔豬),可直接在豬舍內電擊處死后再裝入密閉袋中,運到無害化處理點。


不建議采用非人道的方式處死感染豬。及時對淘汰豬轉移過程中所經過的路面進行徹底消毒。為減少交叉感染,原則上,在撲殺清除豬的工作中,不使用不同棟舍的生產人員,可使用后勤和辦公人員。撲殺和無害化處理結束后,參與撲殺行動的人員需進行淋浴,至少7天內不可與其他健康豬群進行直接或間接接觸;個人衣服和鞋子必須浸泡消毒,烘干后方可繼續使用。

清除過程中的消毒


地面消毒:采用NaOH和戊二醛噴灑地面和圈舍圍欄。消毒水的溫度要達到20℃以上。消毒液作用時間至少30分鐘。地面也可使用火焰消毒。


用具消毒:最好使用一次性防護服,處置后進行焚燒。個人衣服需要浸泡消毒。電擊用具需要熏蒸消毒或60℃烘干30分鐘以上。


清除后環境監測


清除病豬或感染豬后,每間隔7天,采用全覆蓋采樣進行qPCR檢測,直至21天(即規定的封鎖期限)監測均為陰性且豬群無異常,精準清除獲得成功。


三、構建完善的豬場生物安全

豬場生物安全是當前防控ASF唯一有效措施。在ASF流行時期,生物安全是豬場能夠正常生產的前提,決定著豬場運營的成敗。


提高防控意識


豬場應充分認識到ASF巨大危害及通過生物安全措施防控該病的可行性和有效性。一是樹立入場隔離消毒意識。入場的所有人員、物資均視為懷疑帶毒者,必須經過嚴格的清洗、隔離、消毒程序,方可進場。二要明確凈區與臟區。兩者為相對的,存在病原污染風險或污染風險較大的區域為臟區,病原污染較少或已被清潔的區域為凈區。三要加強豬場人員的生物安全培訓。保證每個人自覺遵守生物安全準則,主動執行生物安全措施,積極糾正操作中的偏差。


建立ASF生物安全防控圈


建立多層生物安全防控圈:第一層需設置人員隔離區域;第二層設置賣豬、淘汰豬中轉站(必須做好日常消毒),徹底切斷外部車輛帶入ASFV的可能;第三層為豬場的實體圍墻,除天然屏障外,生產生活區與外界用圍墻徹底隔斷,圍墻外部可設置防護溝、防護林等;第四層要求生產區與生活區進行隔離,不同生產區之間進行隔離。不同防控圈之間建立消毒設施,做到層層切斷。


建立場外生物安全體系


場外生物安全體系建設即對威脅到豬場的所有外部因素進行綜合控制,以降低其對場內豬群的威脅。外部生物安全影響因素包括豬場的選址、人員入場管理、車輛管理、物資入場管理、豬群轉運和生物媒介的清除等。


豬場位置應選擇人員稀少、偏僻安靜的區域。距離公路、鐵路主干線1000米以上,遠離居民生活區,距離其他養殖場及屠宰場2000米以上。


建立嚴格的人員、物資(包括大宗物品、精液等)入場程序。配備豬場內轉運車輛,外來車輛禁止入場。在距豬場1-3公里左右建設標準化的洗消中心,并配備車輛烘干裝置,配置專門人員對外來車輛進行清洗消毒。


健全場內生物安全體系


場內生物安全體系包括豬場內部布局、生產管理、消毒措施、糞污處理等。豬場嚴格進行分區,包括生活區、生產區和廢棄物處理區。


生產中人員、物品及豬群應遵循從凈區向臟區單向流動,若需要從臟區向凈區流動,需要經過隔離、消毒等程序方可。豬場生產區道路也應區分凈道、污道,兩條路線互不交叉,出入口分開。凈道用于人行和飼料、物資的運輸,污道為運輸糞便、病死豬和廢棄設備的專用道,因條件限制出現交叉時應及時清洗消毒,保持凈道的完整性。


推薦采用全進全出、多點式飼養、分批次飼養等管理方式,切斷ASFV在豬場內部的循環傳播。


科學實施日常監測


建立ASF預警體系,做好ASFV的定期監測。獸醫及飼養人員應每天巡查豬舍,檢查豬群健康狀況,包括觀察豬的臨床癥狀、異常行為、采食、飲水等情況,及時發現異常情況,果斷處置,保障豬群健康。


(1)主動監測

對于未發生ASF疫情的養殖場,開展主動監測是十分必要的。重點應放在異常豬只、車輛、人員、生產資料、物品等能與外界接觸的環節和風險因素。有條件的養殖場,應配備檢測儀器,進行現場檢測。


異常豬只:厭食、嘔吐、血便、身體發紅、口鼻出血、打針流血不止(凝血不良)、發燒、流產、突然死亡等一切不正常的豬只,均需進行采樣檢測。


正常豬只:按照隨機抽樣原則,進行抽樣檢測。


依據風險,應對運輸工具、出豬臺、場區大門、生產區豬舍內環境等進行常規采樣和監測。


(2) 被動監測

對于已發生疫情的養殖場,一旦確診,禁止場區內人員、物品等一切流動,防止ASFV擴散。按照“疑似發病豬場采樣”進行相關樣品采集,開展監測工作。


發病豬場進行精準清除后,須進行風險豬只的全群采樣檢測,連續2次,之間間隔5-7天。


(3) 溯源調查

溯源調查是分析疫情發生原因的基礎,劃分生產單元、確定污染范圍是精準清除的關鍵。查看人員、物品記錄表,分析首發病例出現前21天以來與外界交流的一切人員、車輛、物品流通環節等。針對外來人員、車輛、物品重點進行采樣監測。分析ASFV感染軌跡,確定感染源及初始感染范圍。如風險豬群存在外調情況,還應進行追蹤調查。


四、規范實施消毒及污染源消除

消毒方法


機械性消除:用機械的方法如清掃、洗刷、通風等消除病原體,是最普通、常用的方法,可以清除90%以上的病原。


物理消毒法:包括陽光、紫外線和干燥、高溫等,均有較強的殺菌能力。


化學消毒法:消毒劑種類很多,是獸醫防疫實踐中最常用的消毒方法之一。


生物熱消毒:生物熱消毒法主要用于污染的糞便、垃圾等的無害化處理。


化學性消毒劑

ASFV對醚和氯仿敏感。ASFV經氫氧化鈉(30分鐘)、次氯酸鹽(30分鐘)、福爾馬林(30分鐘)、鄰苯基苯酚(30分鐘)或碘化物作用后即可失活。有效的消毒劑包括洗滌劑、次氯酸鈉、戊二醛、過硫酸氫鉀、二氯異氰脲酸鈉、次氯酸鈉和檸檬酸等。常用的消毒劑見表1。


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表1  豬場常用消毒劑及消毒方法

注意事項:1.清潔狀態下的干燥是有效的消毒方式;2.步驟:清理-清洗-干燥-消毒-干燥;3.計算好用量,現配現用;4.參與噴灑消毒的人員注意自身防護(如防護服、水靴、手套、口罩、眼罩等),同時也避免消毒人員與被消毒對象的交叉污染;5.霧化與熏蒸空間須保證密閉性,密閉消毒后應通風或等待30分鐘以上再進入(當使用的消毒劑有較大刺激性時)。


污染源消除技術


(1)車輛消毒

運豬和豬糞便運輸車輛:市場洗車點清洗(一級洗車點)→到達定點的洗消中心(二級洗消點)→檢查合格→車外車內的清洗(消毒設備1)→檢查合格→車外車內消毒、烘干(消毒設備1)→采樣→移到安全位置定點停放(不是豬場附近,保證停車環境周圍無固定或移動的風險)→檢測→合格后開車到場(上車前司機穿著防護衣鞋)→靠場定點消毒點(三級洗消點)的消毒、烘干(消毒設備2)→完成業務→離開(車輛一旦靠場,司機全程不下車)。

其他停靠豬場的車輛:車輛停靠場定點消毒點→定點停靠→消毒、烘干(設備2)→完成業務→離開(除專用的中轉人員和物資車外,其他車輛從靠場后開始,全程不允許下車,若必須下車,則需穿好防護衣鞋,若必須反復上下車的,則每一次下車時都需再次對鞋底進行消毒處理,注意細節)。


(2)豬場場區環境消毒

生活區:隔離區、服務區、生活區辦公室、食堂、宿舍、公共娛樂場及其周圍環境每天消毒一次。


生產區:每天對生產區道路進行至少一次大消毒,生產區各棟舍之間的空地要定期清理、除草,保持干凈整潔。


裝豬臺:距離出豬臺500米以上下游、下風向平坦處設置外來車輛的清洗消毒間。地面鋪水泥,形成1-2度的傾斜度,注意沖洗消毒后水流動的方向,不能污染豬場生產與生活區。外來車輛先在此處全面沖洗消毒后才能靠近出豬臺。裝卸臺外部應該是單向通行,出去的豬絕不能再回到場區。


趕豬道:每次場內轉豬后,應對趕豬道進行徹底的清掃和消毒。同時,每周對場內所有趕豬道進行一次徹底消毒。


解剖臺:解剖只能在解剖臺上進行,嚴禁在生產線內解剖豬只(特殊需要除外)。解剖豬只后,相關人員不能直接返回生產區,如果有需要,要求重新進入洗澡間淋浴消毒、更衣、換鞋。每次剖檢后應對解剖臺及相關用具、環境進行徹底消毒。


(3)物資消毒

員工食材:在場外進行清洗消毒分裝后進入場內,最好由場外直接配送熟食。


獸藥等小型物資:放于熏蒸間熏蒸消毒或霧化消毒,持續作用30分鐘,經檢測合格后入場。


飼料等大件物資:臭氧消毒,持續30分鐘,經檢測合格后入場。


(4)人員消毒

進場步驟:過自動噴霧消毒通道、洗手消毒(消毒機)、修剪指甲、登記、手機消毒處理、物品進熏蒸間消毒、淋浴更衣換鞋,方可進入生活區隔離。


消毒要求:人員進入豬舍前需腳踏消毒盆,消毒盆(池)每天更換一次消毒液。員工不得由隔離舍、賣豬室、解剖臺、出豬臺直接返回生產區,若有需要,應重新進入洗澡間淋浴消毒、更衣、換鞋。生產區工作人員在工作期間必須穿工作服和工作鞋,工作結束后必須將工作服留在更衣室內,且每天進行洗消;嚴禁將工作服、鞋穿入生活區內。生產區每棟豬舍門口、產房、保育舍各單元門口設消毒盆(池),并定期更換消毒液,保持有效濃度。


(5)欄舍空欄清洗消毒

沖洗前準備:將母豬自由采食料筒和料槽內剩料收集,飼喂淘汰母豬。摘下母豬和仔豬料槽,統一放在欄位的一側。將烤燈摘下,統一放置舍外,消毒藥刷洗。將豬舍內雜物清理干凈。準備高壓熱水清洗機、消毒機、消毒桶、消毒藥、泡沫劑、清洗劑、泡沫槍頭、沖欄雨衣和頭燈等。


欄舍沖洗:全面沖洗通風小窗、料線、水管、料桶、料管、料槽、單體欄、漏糞地板、擋板、墻壁、地面、地溝及地溝側墻。沖洗標準為擋板上沒有可視糞渣和其他污染物;產床上沒有糞便、料塊;漏糞地板縫隙沒有散料和糞渣;料槽死角沒有剩料殘渣;糞溝內沒有可視糞便;料管及百葉無可視灰塵。執行正確的沖洗順序,首先開啟噴淋設備,對豬舍噴淋20-30分鐘(或清水打濕),浸泡30分鐘以上;然后使用高壓(熱水)清洗設備對豬舍屋頂、料筒、料管、料槽、風機百葉、門窗、通風小窗、地溝、墻壁、限位欄、漏縫地板進行沖洗,保證首次沖洗質量;拐角、縫隙等邊角部分可用刷子進行刷洗,確保沖洗徹底。做好沖洗檢查。對沖洗后欄舍各個部位進行逐項檢查并評分。不符合沖洗質量標準的欄舍按要求進行返工沖洗,至驗收合格后方可進行下一步工作。欄舍消毒可采用兩次消毒法,第一次消毒后,應用風機干燥(冬、春季節可配合暖風爐烘干12小時)。第二次消毒后再次采用風機干燥(冬、春季節可配合暖風爐烘干12小時)。第一次發泡劑消毒后干燥切忌不要過于徹底,以欄舍表面無明顯水滴為宜。


此外,對沖洗、消毒過的豬舍環境進行微生物檢測和病原檢測。PCR檢測評估環境病原存活情況;微生物菌落總數在200cfu/平方厘米以內,ASFV檢測為陰性。檢查合格后,空欄應達5天以上。


(6)器械消毒

托盤:將托盤內所有物品拿出,放置于工作臺上。將托盤充滿水和消毒劑浸泡30分鐘。倒掉水和清潔劑,用牙刷刷洗一遍,再用清水沖洗干凈。


注射器:將所有部件松開,逐個沖洗各部件,清洗完畢后把注射器正確組裝好,但要保持松動。


針頭、鑷子、手術刀柄、剪牙鉗、斷尾鉗放入充滿水和消毒劑的容器中浸泡30分鐘。來回晃動5分鐘,用清水涮洗3遍。


高壓滅菌消毒:將所有清洗過的器械和物品放入高壓鍋中,高壓滅菌15分鐘,滅菌完畢后將所有器具放入干燥箱中烘干,干燥后待用。


(7) 生產工具消毒

接產車、胎衣桶、生產區車輛(小推車)、擋板、扒料鏟子、掃帚、鐵锨、產房料槽、誘食槽,每次使用完后采用噴霧或浸泡消毒。消毒時間一般30分鐘,除斷尾鉗每次消毒一次外,其余均為每日消毒一次。


(8) 工作服消毒

生活區內工作服每日清洗消毒一次,生產區內工作服每日清洗消毒,工作服清洗消毒后填寫《工作服清洗消毒記錄表》。每天對工作服的清洗消毒進行檢查并記錄。


(9) 水消毒

水井和蓄水池可使用氯制劑或碘制劑消毒。每周1次,有條件的,可定期對水源進行ASFV檢測。水線可安裝過流式紫外線消毒器及二氧化氯發生器。定期對水線進行病原檢測。


五、復產前的風險管理


工作原則


1.統籌衡量、區別對待。按照污染面的大小、污染程度等進行等級劃分,由高到低進行清掃、清除、清潔。


2.按照豬場布局及生物安全四級關口(綠/黃/橙/紅)進行清除和消毒工作,每個區域完成驗收后進行封閉隔離,停止一切人員操作。


3.全部工作同步進行,多目標統籌協調并進。


制作生物安全風險等級電子平面圖

全部清群(或單元清群)結束后,對疫情進行風險等級自我評定,并依據污染面和qPCR環境檢測,制作“1+N”電子平面圖。“1”-豬場總平面圖,“N1”-生產區內部平面圖,“N2”-生產區外部及場外1km范圍內平面圖,“N3”-生活區平面圖。


復產前的采樣檢測

1.采樣位點

全覆蓋采樣:以區塊為單位,對其內部所有墻體、地面、設備等表面進行全覆蓋采樣。

重點位點采樣:作為全覆蓋采樣方法的補充,包括死角、料槽底部等不容易采集到的位置。


2.采樣時間點

(1)初步清洗完成后采樣檢測,了解當前具體污染程度,并為下一步清洗消毒工作提供參考。

(2)徹底清洗完成后采樣檢測,評估清洗效果。

(3)消毒后采樣檢測(細菌培養+ASFV核酸檢測),評估消毒效果。

(4)后備豬全面進場前采樣檢測。

(5)復檢檢測。


3.采樣對象

(1)生產區內。包括各區間豬舍內所有區間單元墻體、地面、地溝、設備、風機、通風小窗、水線、料線、門、窗、濕簾、飲用水等。

(2)生產區外。以污染程度劃分區域,包括地面、草坪、風機口、污水池、發酵大棚、料塔、出豬臺、水渠、下水道、員工宿舍、維修房、儲物間、浴室、辦公室、餐廳廚房、機房、車輛、水源等所有可能污染的位置。

(3)場周邊區。豬場周圍道路。


4.采樣準備

(1)穿戴隔離服、鞋套、一次性手套,將醫用紗布拆開后放入方便袋中,加入適量0.3%甲醛溶液達到醫用紗布潮濕即可。不同區塊間采樣需更換一套隔離服、鞋套、一次性手套。

(2)全覆蓋大平面采樣可用浸潤的拖布進行擦拭,非平面全覆蓋手工擦拭。

(3)草坪、地面全覆蓋采樣可用耙式采樣器+繃帶,往返耙地。不方便用采樣器的硬地面可采用推薦制作的采樣器進行采樣。


分區塊精準化ASFV消減過程環境風險等級界定


通過不同豬場結構劃分生產區、生產區外部、生活區以及其他,分等級的顏色管理、監測和時間衰減繪制圖表和管理方式。


1.生產區

進行豬只日常飼養管理、轉移及飼養人員休息就餐、藥械物資及維修用品消毒存貯等所涉及到全部區域,包括配種舍、后備隔離舍、培育舍、誘情舍、產房、待轉舍、豬只轉移連廊、出豬臺、操作間、清洗房等綠區內立體空間全部實物(墻體、地溝、設備、管線等)以及淋浴間、熏蒸間、人員休息間、維修間等黃區立體空間內全部實物。


2.生產區外部

生產場區棟舍外所有區域以及場外靠場主干道路、污水站及附屬區域,包括生產區道路、棟舍之間空地、發酵棚、出豬點、料塔、發電機房、維修房以及場外靠場主干道路等。


3.生活區

人員及物資進入、存儲及生活休息的所有立體空間及娛樂區域,包括人員進場淋浴場所、物資進入熏蒸消毒通道、各類物資存儲間、各類宿舍、辦公室、會議室、廚房、餐廳、生活區、娛樂區域、洗衣房及周邊空地等。


豬場內部環境清理/清潔/檢測(詳見表2)

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表2  豬場內部環境清理/清潔/檢測


設備/設施/物資模塊改造升級、維保詳(見表3)

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表3、設備/設施/物資模塊改造升級、維保

復產消毒方案


1.基本要求

(1)消毒前應將所有有機物(分泌物、毛發、糞尿、死豬組織)完全清空。


(2)所有表面全面經過清掃、清洗、擦拭、干燥之后開始進行消毒。


(3)消毒順序由內到外,依次從生產區、辦公區、生活區、廠區環境進行。集中力量開展全場大消毒,防止各區域交叉污染。


(4)可使用火焰噴槍對豬場地面及表面物體進行消毒。表面光滑的物體經3-5秒鐘火焰消毒可以達良好的效果;粗糙的地面或區域應適當增加消毒時間。


2.消毒方案(詳見表4)


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表4  復產消毒方案


六、優化種豬繁育模式,保障種源供給


種源供給是生豬復產的重要保障,應從以下六個方面來優化種豬繁育模式:


一是適當調整生產母豬的品種結構。傳統商品豬場通常需要常年引進大量的長大、大長二元雜母豬補充淘汰的生產母豬(引種前要進行檢測)。為最大程度減少引種次數,可以引進純種長白或者大白,通過場內擴繁,生產二元雜母豬,減少引種風險。


二是靈活應用品種配套模式。有效提高養豬生產效率的品種配套模式是充分利用雜交優勢,目前我國養豬業中主要有杜長大、杜大長純種配套生產模式和配套系生產模式。出于生產安全時封場的現象,為實現滿負荷生產,必要時可以采取回交的方式補充生產母豬,亦即早期挑選體型外貌符合要求的杜長大、杜大長青年母豬,按照后備母豬要求培育為優質父母代母豬。為盡量減少生產效率的降低,終端父本的選擇顯得尤為重要,最好的模式是用父系大白作為終端父本,其次長白,而盡量避免使用杜洛克作終端父本。


三是采用商品化公豬精液。終端父本的遺傳性能影響商品豬生產性能的一半,所以優良公豬在養豬生產中具有十分重要的作用,尤其是按上述方法改變了生產母豬的品種結構或品種配套模式的情況下,可以購買符合生物安全要求的優良公豬精液(要確保進行過非洲豬瘟檢測),而場內則只飼養在商品豬中挑選合適的公豬作為試情公豬。此外,使用冷凍精液可以較常溫精液更好地適應生產節律,減少物流次數。


四是應用生物技術保存優良遺傳資源。對于種豬育種場有必要應用現代生物技術保存場內的優良遺傳資源,以備未來克隆恢復。生物技術保存遺傳資源主要包括以下4個層面,即DNA組織樣保存、體細胞庫建立、冷凍精液保存和冷凍胚胎保存。


五是應用基因組選擇技術,保障持續選育。品種的持續改良則關乎企業長期的核心競爭力。基因組選擇技術的應用可在一定程度上保障種豬育種工作的持續進行。基因組選擇(GS)是一種利用覆蓋全基因組的SNP標記而進行的標記輔助選擇技術,它可以提高選擇的準確性,同時還能夠實現早期選擇,因此當建立了參考群后,可以大量減少現場測定的個體數,從而有利于ASF防控。


六要強化引種隔離。養豬生產中,根據生物安全的需要,對新引進的種豬都需要采取隔離的措施來降低新引進種豬攜帶ASFV而污染原生產群的可能性,同時也避免新引進種豬直接暴露于大量原豬群的病原微生物之下。應對擬引進的種豬進行逐頭檢測,確認ASFV陰性,并在隔離舍隔離30天,期間進行臨床監測和隨機抽樣檢測。


七、嚴把飼料關

為防止ASF通過飼料環節傳入的風險,必須嚴把飼料關:

一要做好飼料原料的采購。優質、安全的飼料原料采購環節是生物安全的第一道防線。原料采購前應對要采購的原料進行充分的生物安全評價,必要時現場取樣進行ASFV核酸檢測。我國飼料原料分散,運輸跨度大,在運輸環節上需防止二次污染。對植物蛋白類原料來說,經過高溫處理的原料生物安全性高于低溫處理的,比如高溫豆粕(餅)生物安全性高于低溫豆粕(餅),但也要防止原料在加工、運輸環節中的二次污染。


一般來講生物安全等級順序為:非疫區國家來源原料(進口)>玉米酒精糟、氨基酸、維生素>國產大宗原料-玉米(ASFV檢測核酸陰性)=規范生產的國產豬源性產品(ASFV檢測核酸陰性)>經過45天隔離期的玉米等(ASFV檢測核酸陽性)=規范生產的國產豬源性產品(ASFV檢測核酸陽性)>未經隔離或其他方式處理的玉米等大宗原料(ASFV檢測核酸陽性)>不規范生產的國產豬源性產品。


二是做好原料采購、運輸和驗收。采購前期評估過且生物安全評價高的原料。對于來自ASF疫區的玉米等大宗飼料原料,建議不采購未經過高溫處理或未經證明為ASFV核酸檢測陰性的原料。不采購可疑動物源性飼料原料,特別是不符合農業農村部第91號公告規范要求生產的豬源性血漿蛋白粉、血球蛋白粉、腸膜蛋白、肉骨粉、豬油等。不采購摻假蛋白原料,特別是可能摻入豬源飼料的魚粉、雞肉粉等。在使用進口飼料原料時,只采購來源于無ASF疫情國家的飼料原料。做好飼料原料的運輸車輛的全面消毒工作,運輸路線避開疫區,原料采用包裝袋封裝,運輸車廂需用塑料布或帆布覆蓋封閉,防止飼料在運輸途中被污染。飼料原料驗收時,對玉米等大宗原料,要定期(如每兩周一次)在下料口取粉塵樣品,進行ASFV核酸檢測。特別需要注意的是,飼料運輸車也會攜帶非洲豬瘟病毒,運輸前必須進行規范消毒。


三要做好原料儲存和生物安全措施。驗收完成后的安全原料應儲存在沒有ASFV污染的庫房,做好防護措施,定期環境消毒,杜絕二次污染。對可疑的原料需采取必要的安全措施消除ASFV污染的潛在風險。主要操作方法有:1.熱處理,通過把原料加熱到60℃保持30分鐘,或高溫80℃-90℃保持3分鐘以上。2.膨化,把原料采用膨化處理,比如單獨膨化玉米、豆粕或者大豆,也可以把玉米和豆粕按照比例混合后,進行全膨化處理。3.發酵,把玉米、豆粕和麥麩按照比例混合后,采用芽孢桿菌、乳酸桿菌和酵母等微生物進行混合發酵。4.放置,不具備以上處理條件的,可以在常溫、干燥隔離庫房中將原料隔離放置45天以上。


四要優化飼料加工工藝。為了有效地殺滅ASFV,消除潛在的風險,飼料加工采用高溫制粒工藝,主要是提高制粒溫度,延長調質時間,保證調質溫度>85℃,調質時間超過3分鐘以上。對于未達到要求的飼料制粒工藝需增加蒸汽量,確保調質器中物料溫度達到850℃以上,并適當延長調質時間。

五要做好飼料轉運。飼料的運輸車輛要全面、徹底、有效的消毒處理,對車輪、車廂和駕駛室等部位進行ASFV檢測,檢測病毒核酸陰性視為合格。同時要與飼料原料運輸車輛嚴格分開,實行專車專運。飼料運輸過程中,運輸車廂用塑料布和帆布覆蓋封閉,需避開疫區的運輸路線。飼料應首先從飼料生產車間運送到安全的、無ASFV污染的飼料中轉站,不能直接運送進豬場。使用散裝料的豬場要注意飼料在裝料、運輸和卸料過程中的二次污染,平時應對裝料口、卸料絞龍采用塑料布包裹密封。


八、改造豬舍,優化生產管理

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